Морфологические методы doc



страница6/30
Дата14.03.2019
Размер4.42 Mb.
#75249
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   30

Заливка в парафин


Заливка в парафин производится следующим образом. Объ- ект из 2-го абсолютного спирта переносят на 1-3 ч. в смесь рав- ных количеств хлороформа c абсолютным спиртом, затем на 1,5- 2-3 ч. в первый хлороформ и на такое же время во второй хлоро- форм. Для постепенного пропитывания материал из хлороформа

переносят в смесь хлороформ – парафин на 2-3 ч. (при температу- ре 35-400). Далее объект переносят в первый чистый парафин, а че- рез 1,5-2 часа – во второй чистый парафин и оставляют его там на 1- 1,5 ч. Парафин должен быть заранее приготов-

лен1 и находиться в термостате, установлен-

ном на 2-3 выше точки плавления парафина2.

В продаже имеются также и готовые парафины: например, гомогенизированная парафиновая среда для заливки HISTOMIX® применяется для пропитывания исследуемо- го материала при гистологической проводке тканей и для последующей заливки блоков. Она уже содержит в своем составе натураль- ный воск и синтетические полимерные до-

бавки и не требует дополнительной фильтрации и гомогенизации, а также добавления каких-либо модифицирующих веществ (вос- ков, масел и т.п.). Фасовка по 5 кг. Имеется и модификатор для

увеличения плотности блока. Также может использоваться при более высокой температуре окружающей среды (25-26 °С). С помощью этого модификатора можно получать бо- лее тонкие срезы (2 мкм) при обыч- ной комнатной температуре. Моди-
Приготовление парафина (гомогенизация): нагревают на водяной бане в фарфоровой посуде и быстро охлаждают в снегу или холодной воде. Для придания пластичности рекомендуют добавлять пчелиный

воск (до 5%), однако такая примесь воска повышает t плавления, так как воск имеет температуру плавле- ния 62-670 С.



Для гистологических целей наиболее подходит аморфный парафин с температурой плавления 48-52 0С.

фикатор следует вводить из расчета 1 часть модификатора на 10-20

частей Гистомикс.

Баночки или тигли с чистыми парафинами держат открыты- ми, чтобы в них не осталось и следов ксилола.

Таким образом, для заливки в парафин надо иметь баночку со смесью абсолютного спирта с ксилолом, 2 баночки с ксилолом, баночку со смесью ксилола и парафина и, наконец, 2 баночки с парафином. При заливке в парафин в качестве промежуточных сред между спиртом и парафином, кроме ксилола, могут быть использованы хлороформ и бензол.

Для окончательной заливки необходимо иметь в термостате расплавленный в колбе парафин. Его наливают в формочку, предварительно смазанную глицерином, переносят туда пропи- танные парафином кусочки, далее формочку осторожно перено- сят в холодную воду. Из затвердевшего парафина вырезают пря- моугольные блоки с залитыми кусочками, вокруг которых оста- ется слой парафина шириной 1-2 мм. Такой блок прикрепляют на деревянный кубик, предварительно поместив на последний не- много расплавленного на шпателе парафина, чтобы он прочнее соединился с расплавленным парафином на кубике. Затем под- плавляют шпателем боковые стороны блока для лучшей фикса- ции с деревянным кубиком. Эти процедуры удобно проводить морфологическим шпателем [19] со встроенным керамическим нагревательным элементом на 50 ватт.

Шпатель поддерживает постоянную температуру, не требует подогревания от внешнего источника тепла, как это бывает при ис- пользовании обычного шпателя и горелки. Морфологический шпа- тель имеет два температурных ре-

жима и работает от сети 220 В. Он прошел многократные испытания в отделе патологической морфологии ВНИВИПФиТ, результаты которых показали, что конструктивные осо- бенности шпателя, а также возмож- ность постоянного нагрева его ра- бочей части позволяют упростить

приготовление и посадку парафиновых блоков на колодки, что зна- чительно снижает трудоемкость данного процесса и ускоряет его.

При использовании заливочных колец и заливочных форм отпадает необходимость прикрепления блока на деревянную ко- лодку, так как кольца вкладываются в заливочные формы в мо- мент формирования блока и в дальнейшем служат его основани- ем. Однако в связи с этим возрастает и расход парафина.



Заливочные формы выпускают разных размеров:

многоразовые:


7х7х5 мм

15х15х5 мм

24х24х5 мм

30х24х5 мм

37х24х5 мм













одноразовые:

7х7х5 мм

15х15х5 мм

24х24х5 мм

30х24х5 мм

37х24х5 мм


















Поделитесь с Вашими друзьями:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   30




База данных защищена авторским правом ©www.vossta.ru 2022
обратиться к администрации

    Главная страница